2.×μm UHPLC色譜柱
要完全實(shí)現(xiàn)UHPLC色譜柱的更高柱效，就必須讓液相系統(tǒng)的擴(kuò)散效應(yīng)對色譜柱的影響盡可能小。小顆粒色譜柱，會(huì)讓色譜峰更窄更尖銳，提高分離度；但是，更窄的色譜峰，對柱外擴(kuò)散體積更為敏感。因此，根據(jù)系統(tǒng)的擴(kuò)散體積，匹配合適的色譜柱規(guī)格，對于實(shí)現(xiàn)分離性能至關(guān)重要。
如何選擇合適的亞三微米色譜柱？
根據(jù)如下四步驟加以考慮：
色譜填料/鍵合相的選擇性與耐受性：滿足目標(biāo)應(yīng)用的需要；
色譜柱長與粒徑的比值L/dp：色譜柱的柱效水平是否滿足目標(biāo)應(yīng)用的分離度需求；
柱長L與粒徑dp對柱壓的影響：考慮色譜柱運(yùn)行柱壓，是否能兼容您的液相系統(tǒng)；
色譜柱內(nèi)徑：對于擴(kuò)散體積較大的系統(tǒng)，選擇4.6 mm內(nèi)徑，可以減少系統(tǒng)對柱效的影響程度。
色譜柱規(guī)格選擇指導(dǎo)
|
系統(tǒng)
|
HPLC
|
UHPLC
|
UPLC
|
|
擴(kuò)散體積測量值
|
>40μL
|
22-29μL
|
<20μL
|
|
常規(guī)操作壓力
|
<4000 psi
|
<10,000 psi
|
<18,000 psi
|
|
色譜柱粒徑
|
3-5μm
|
2-3μm
|
<2μm
|
|
色譜柱內(nèi)徑
|
4.6 mm (3.0 mm)
|
3.0mm (2.1mm)
|
2.1mm (1.0 mm)
|
|
色譜柱長度
|
75-250mm
|
50-100mm
|
≤150mm
|
以上根據(jù)Waters LC系統(tǒng)來推薦色譜柱規(guī)格。
對任何LC系統(tǒng)都適用的柱規(guī)格
在轉(zhuǎn)移LC方法時(shí)，儀器譜帶展寬是需要確定的十分關(guān)鍵的LC儀器參數(shù)之一。了解譜帶展寬，能幫助色譜分離化學(xué)家所開發(fā)的方法，兼容任何一臺(tái)LC系統(tǒng)。如下色譜柱規(guī)格表，基于儀器譜帶展寬名義測量值。
|
系統(tǒng)
|
LC技術(shù)
|
譜帶展寬*
|
推薦色譜柱的粒徑與內(nèi)徑
|
|
Shimadzu Prominence UFLC
|
HPLC
|
41μL
|
XBridge 3.5, 5μm; XSelect 3.5, 5 μm;
CORTECS 2.7 μm
3.0–4.6 mm I.D.
|
|
Alliance 2695 HPLC
|
HPLC
|
29 μL
|
|
Agilent 1260 UHPLC (600 bar)
|
HPLC
|
28 pL
|
|
Thermo Accela UHPLC
|
HPLC
|
21μL
|
XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm;
CORTECS 2.7 μm 3.0 mm I.D.
|
|
Agilent 1290 UHPLC (1200 bar)
|
UHPLC
|
17 μL
|
|
ACQUITY Arc
|
UHPLC
|
23 μL
|
XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm;
ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,
CORTECS 2.7 μm
3.0 mm I.D.
|
|
ACQUITYUPLC
|
UHPLC
|
12 μL
|
ACQUITY UPLC BEH 1.7 μm;
ACQUITY UPLC CSH 1.7 μm;
ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm,
CORTECS 1.6 μm
2.1 mm I.D.
|
|
ACQUITY UPLC H-Class W/Column Manager
|
UPLC
|
12 μL
|
|
ACQUITY UPLC H-Class
|
UPLC
|
9μL
|
*這些測量數(shù)值基于未經(jīng)調(diào)整的儀器，僅作為參考。對于系統(tǒng)的泵、管路連接、以及儀器參數(shù)的任何調(diào)整，都會(huì)改變該儀器的譜帶展寬。
